Assassin's Creed II – это приключенческий экшен от третьего лица. Действие игры происходит в средние века в Италии. Современный потомок величайших убийц в истории Дезмонд оказывается в теле Эцио Аудиторе де ла Фиренце, мастерски владеющего хашшашинскими навыками. Разработчики предлагают игрокам улучшенную и обновленную геймплейную систему из первой части серии - Эцио все так же может перемещаться как по земле, так и по крышам, научился плавать, и обновил свой арсенал навыков и приспособлений.

В начальных миссиях в распоряжении игрока представлена система свободного перемещения с возможностью взобраться почти на любой объект. Стелс-составляющая позволяет использовать различные приемы - у игрока появился выбор, как лучше исчезнуть в той или иной обстановке: можно раствориться в толпе, укрыться в стогах сена или садах на крышах, нырнуть под воду, устроить неразбериху, кину в толпу нищих несколько монет или отвлечь внимания врагов при помощи специально нанятых людей. Бои в игре блещут разнообразием благодаря большому арсеналу доступного оружия: мечи, кинжалы, дымовые бомбы, метательные ножи, - далеко не все инструмент смерти, доступные персонажу. У каждого оружия свои сильные и слабые стороны и, конечно, своя анимация. Оружие можно покупать в магазинах и пользоваться им постоянно или на время боя отбирать у врагов.

Помимо основной сюжетной линии игроков так же ждет ряд побочных заданий и даже симулятор средневекового помещика - которое, разумеется, предстоит отстроить заново. Кроме этого, игроков так же ждет охота за легендарными сокровищами ассасинов, целый набор разных мини-игр, огромное количество разнообразных исторических личностей, а так же продолжение таинственной истории, связанной с так называемыми "Яблоками Эдема".